optymalizacja PCR.pdf
(
194 KB
)
Pobierz
-łańcuchowa reakcja polimerazy
(polymerare
chain reaction)
W połowie lat 80 opracowano technikę,
służącą do amplifikacji (powielania)
dowolnej sekwencji DNA z użyciem pary
oligonukleotydowych
starterów
oraz
termostabilnej polimerazy DNA.
PCR przeprowadza się całkowicie in
vitro, bez wykorzystania komórek.
•
Denaturacja dwuniciowego DNA w
95
o
C
•
Przyłączenie startera do matrycy w
temperaturze ok.55
o
C
•
Polimeryzacja w
o
C
72
•
•
•
•
•
•
Matryca DNA lub RNA
Startery
Bufor
Substraty-dNTP
Jony Mg
2+
Termostabilna polimeraza DNA
KOMPONENTY
Woda dest. dejonizowana
STĘZENIE
ILOŚĆ NA 100
µ
l
MIESZANINY REAKCYJNEJ
Zmienna
10 × bufor
2 mM dNTP mix
Starter I
Starter II
Polimeraza Tag DNA
25 mM MgCl
2
Matrycowe DNA
1×
0,2 mM każdego
0,1-1
µM
0,1-1
µM
2u/100
µl
1-4 mM
10 pg-1
µg
10
µl
10
µl
zmienna
zmienna
zmienna
zmienna
zmienna
Plik z chomika:
michalak.daria
Inne pliki z tego folderu:
Zastosowanie genetyki w hodowli, rolnictwie i medycynie.docx
(16 KB)
Perspektywy rozwoju genetyki.docx
(19 KB)
transkrypcja - regulacja.pdf
(3175 KB)
transkrypcja.pdf
(3038 KB)
Histologia i fizjologia macierzy.pdf
(1266 KB)
Inne foldery tego chomika:
biomechanika
Bobath
Ćwiczenia
Czerwiec 2010
Danielle Steel Książki
Zgłoś jeśli
naruszono regulamin